工作中你是否會(huì)遇到一些C18柱難以保留的化合物？在前述文章中我們說到，部分不保留化合物可以通過加入離液劑來增加保留，但是離液劑也有一些無法解決的情況；我們可以通過離子對(duì)試劑來增加保留，但會(huì)改性色譜柱導(dǎo)致不可逆的損傷；還可以通過混合模式來保留，但色譜柱重現(xiàn)性相對(duì)不是很好……

那么，Hilic模式（hydrophilic interaction chromatography，親水作用液相色譜）將是一個(gè)不錯(cuò)的選擇。

Hilic模式是正交于反相與正相體系的一種模式，其固定相為極性，流動(dòng)相則與反相系統(tǒng)相同；主要通過液液分配、吸附作用、離子作用、親水作用等多種復(fù)雜的作用模式來讓極性化合物保留，而并非單一的保留機(jī)制（反相體系主導(dǎo)作用力為疏水作用力）；極性化合物的保留及峰形同樣取決于流動(dòng)相的組成（pH、有機(jī)溶劑）及固定相的種類。在Hilic模式中，乙腈為弱洗脫溶劑，水是強(qiáng)洗脫溶劑，與正相類似，但為了區(qū)別，所以Hilic模式又稱反反相。

在分離時(shí)，流動(dòng)相中的極性溶劑在固定相表面形成一層極性層，而極性化合物由于液液分配等作用也會(huì)更傾向于極性層中而得以保留，因此極性溶劑在Hilic模式的流動(dòng)相中添加量通常為3%--40%，低于3%則無法在固定相表面形成極性層，高于40%（有時(shí)可到50%）則會(huì)破壞這一分配平衡變?yōu)槌Ｒ?guī)的反相模式。